应用ntPCR-RFLP技术检测乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异

• 作者: 于岩岩 冯鑫 宋淑静 成军 王磊 谢雯 闫杰
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 阿德福韦 肝炎病毒,乙型 变异 巢式聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R373.21
• 字数: 3381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5234.2008.01.001

摘要

目的 建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异及rtA181V变异的快速检测方法.方法 根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株rt236N PCR产物中含有DraⅠ酶切位点(5'-TTTAAA-3'),而变异株 rt236T无此限制性酶切位点;使野生株rt181A PCR产物中含有BlpⅠ酶切位点(5'-GCTNAGC-3'),而变异株rt181V 无此限制性酶切位点.选取4份应用ADV治疗1年以上出现HBV DNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、限制性内切酶酶切及凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析.并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各1例进行HBV RT区基因序列分析.结果 建立的ntPCR-RFLP方法可以检测到102copies/L的HBV DNA;RFLP分析结果与DNA测序结果一致,4份血清标本中检测到1份rtN236T变异,2份rtA181V变异.结论 应用ntPCR-RFLP方法检测HBV阿德福韦耐药变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于HBV耐药变异的监测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢雯		79	327	11.0	15.0
2	成军		210	843	13.0	20.0
4	于岩岩	北京大学第一医院感染科	95	955	16.0	27.0
5	王磊	山东大学医学院传染病教研室	268	1703	20.0	30.0
6	宋淑静		32	274	10.0	15.0
7	冯鑫		21	197	7.0	13.0
10	闫杰	北京大学第一医院感染科	2	17	2.0	2.0