突变p53基因的反义拯救研究

• 作者: 付丽 孙玉兰 张媛媛 王亚红 许少峰
• 来源期刊: 中华乳腺病杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 个体性反义RNA p53基因 基因治疗
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 70-80
• 页数: 11页
• 分类号: R737.9
• 字数: 4212字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0807.2008.01.010

摘要

目的 研究p53基因的个体性反义RNA联合野生型p53(wt-p53)对乳腺癌细胞的增殖抑制作用,探讨体外双重基因治疗的意义.方法 将wt-p53重组质粒pC53-SN3转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,G418筛选稳定表达wt-p53的细胞克隆(WTp53-231细胞);体外构建针对MDAMB-231细胞p53基因突变外显子8(exon8)的反义表达载体[pGEM3zf(+/-)p53exon8],并制备其反义RNA(ASp53exon8'RNA);以MDA-MB-231细胞为对照,阳离子脂质体介导下ASp53exon8'RNA转染WTp53-231细胞;转染48h后,用MTT法检测细胞生长活性,TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫细胞化学LSAB染色法检测p53蛋白的表达.结果 ASp53exon8RNA 转染 WTp53-231 细胞与ASp53exon8'RNA转染MDA-MB-231细胞比较,前者可进一步抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡.结论 p53基因的个体性反义RNA联合wt-p53共转染可协同抑制乳腺癌细胞增殖,达到"反义拯救"基因治疗目的 .