人甲胎蛋白基因启动子驱动siRNA表达载体的构建及其在HepG2细胞中RNA效应的初步鉴定

• 作者: 兰风华 庄岳鹏 王志红 王水良
• 来源期刊: 福州总医院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 甲胎蛋白基因启动子 靶向治疗 RNA干扰
• 年，卷（期）: fzzyyxb_2008,（1）
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 分类号: R735.7

摘要

目的：探索基于人甲胎蛋白基因启动子构建的siRNA表达载体介导目的基因RNA干扰的可行性，为实现肝癌细胞靶向RNAi治疗作一初步研究。方法：PCR法扩增获得人甲胎蛋白基因启动子并插入pSilencer1．0-U6中以置换其U6启动子；依据人hIRH-1基因RNAi靶位点设计出siRNA模板DNA,体外合成相应寡核苷酸片段后经退火形成短双链。再克隆构建成靶向人hLRH-1基因siRNA表达载体；脂质体转染法将上述重组质粒转入HepG2细胞中，实时定量RT—PCR法初步分析所建系统在AFP表达细胞中触发靶基因hIRH-1的RNAi效应，以及hIRH-1调控下游靶基因的表达改变。结果：获得人甲胎蛋白基因启动子驱动的siRNA表达载体pSWFPo以人hLRH-1为报告基因，本研究发现所建的RNAi载体系统可在表达AFP的细胞HepG2中有效诱导靶基因表达下调，抑制率约达85％；同时引致hLRH-1调控下游靶基因CydinEl与Oct4的表达相应下调。结论：人甲胎蛋白基因启动子驱动的siRNA表达载体可在表达AFP的细胞HepG2中有效介导靶基因的RNAi效应，为临床肝癌细胞靶向的基因特异性RNAi治疗提供了初步的实验依据。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	兰风华	福州总医院检验医学研究所分子医学研究中心	16	11	2.0	3.0
2	王志红	福州总医院检验医学研究所分子医学研究中心	4	0	0.0	0.0
3	王水良	福州总医院检验医学研究所分子医学研究中心	2	0	0.0	0.0
4	庄岳鹏	福州总医院检验医学研究所分子医学研究中心	1	0	0.0	0.0