内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌与毕赤酵母中的表达

• 作者: 周晨妍 王瑾 邬敏辰
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色木霉 内切葡聚糖酶 大肠杆菌 毕赤酵母 表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 110-114
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3932字
• 语种: 中文

摘要

根据绿色木霉(Trichoderma viride)WL 0422菌株内切葡聚糖酶基因egⅡ的cDNA序列,设计特异引物,以重组质粒pTG19-T-egⅡ为模板,扩增得到全长1 194bp的egⅡ成熟肽cDNA片段.将该片段分别克隆到大肠杆菌(Escherichia coil)表达载体pET-28a(+)和毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC9K中,并在大肠杆菌Rosset(DE3)和毕赤酵母GS115中进行了表达.重组大肠杆菌表达蛋白占菌体总蛋白的15%,表达产物无内切葡聚糖酶活性.重组毕赤酵母经甲醇诱导实现了分泌表达,在摇床水平上酶活性达到2 788U/ml.酶学性质分析表明,该酶作用的最适pH为4.5,pH 3.5～6.0范围内酶活性保留在80%以上;最适温度为50℃,55℃以下酶的稳定性在90%以上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬敏辰	江南大学医药学院	163	1504	22.0	29.0
2	周晨妍	江南大学生物工程学院江南大学生物技术教育部重点实验室	12	146	7.0	12.0
3	王瑾	江南大学生物工程学院江南大学生物技术教育部重点实验室	10	87	6.0	9.0