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人血小板源性生长因子B基因转染对猫角膜内皮细胞增殖的影响
人血小板源性生长因子B基因转染对猫角膜内皮细胞增殖的影响
作者:
刘相萍
杨堃
王传富
罗文娟
胡丽婷
隋爱华
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
血小板源性生长因子
转染
内皮细胞
角膜
聚合酶链反应
组织构建
摘要:
背景:许多研究显示外源性的人血小板源性生长B基因的转染可促进创伤的愈合.目的:用重组人血小板源性生长因子B基因真核表达载体及重组人血小板源性生长因子B基因腺相关病毒转染和感染猫角膜内皮细胞,观察其对猫角膜内皮细胞增殖的影响.设计、时间及地点:分组对照观察细胞基因工程研究,于2007-01/11在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成.材料:健康足月幼猫,体质量250~300 g,雌雄不限.重组人血小板源性生长因子B基因真核表达载体及重组人血小板源性生长因子B基因腺相关病毒由青岛大学医学院附属医院中心实验室自行构建.方法:常规显微镜下撕取内皮培养法,培养出原代猫角膜内皮细胞,传2代的细胞用于实验.脂质体法将重组人血小板源性生长因子B基因真核表达载体转染到猫角膜内皮细胞中,重组人血小板源性生长因子B基因腺相关病毒采用直接感染法.实验分正常对照组、质粒对照组、重组质粒组、腺相关病毒对照组和重组腺相关病毒组.转基因24 h和48 h后收集细胞,Trizol试剂提取其总RNA.主要观察指标:通过荧光定量聚合酶链反应检测目的基因在细胞中的表达.四甲基偶氮唑盐法检测转基因48 h后细胞的增殖活性.结果:①撕取内皮法可方便获取到原代猫角膜内皮细胞.②自行设计的针对目的基因及内参基因的探针引物经扩增后电泳验证及序列测定证明特异性高.③转基因24 h和48 h后荧光定量聚合酶链反应检测人血小板源性生长因子B基因mRNA发现:正常对照组、真核表达质粒对照组和腺相关病毒对照组间差异无显著性意义(P>0.05):重组人血小板源性生长因子B基因真核表达质粒转染组和重组人血小板源性生长因子B基因腺相关病毒实验组与正常对照组相比差异显著(P<0.05).④四甲基偶氮唑盐法检测显示重组质粒转染和重组病毒感染均可促进细胞增殖,真核表达质粒对照组和腺相关病毒对照组与正常对照组相比差异无显著性意义(P>0.05).结论:重组人血小板源性生长因子B基因真核表达载体及重组人血小板源性生长因子B基因腺相关病毒可在角膜内皮细胞中高效表达并具有促进细胞增殖的活性.
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血小板源性生长因子和血小板源性内皮细胞生长因子在内皮细胞和血管平滑肌细胞中的作用研究
血小板源性生长因子
血小板源性内皮细胞生成因子
血管成形术,气囊,冠状动脉
肌细胞,平滑肌
内皮细胞
细胞增殖
含中药血清对血管内皮细胞生长因子诱导的人脐静脉内皮细胞增殖的影响
脐静脉
内皮细胞
血清
内皮细胞生长因子
血小板源生长因子对人血管内皮细胞DNA及胶原蛋白合成的影响
细胞生物学
血小板源生长因子的促细胞增殖作用
细胞培养
氚掺入
内皮细胞
细胞增殖
胶原蛋白
鼠尾胶原联合血小板源性生长因子BB培养内皮细胞
生物材料
材料相容性
人脐静脉内皮细胞
鼠尾胶原
血小板源性生长因子BB
抗凋亡
国家自然科学基金
内容分析
文献信息
引文网络
相关学者/机构
相关基金
期刊文献
内容分析
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(/年)
文献信息
篇名
人血小板源性生长因子B基因转染对猫角膜内皮细胞增殖的影响
来源期刊
中国组织工程研究与临床康复
学科
医学
关键词
血小板源性生长因子
转染
内皮细胞
角膜
聚合酶链反应
组织构建
年,卷(期)
2008,(33)
所属期刊栏目
技术与方法
研究方向
页码范围
6457-6461
页数
5页
分类号
R392.2
字数
6716字
语种
中文
DOI
10.3321/j.issn:1673-8225.2008.33.014
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
王传富
青岛大学医学院附属医院眼科
70
328
11.0
14.0
2
隋爱华
青岛大学医学院附属医院分子生物研究室
92
345
10.0
12.0
3
杨堃
青岛大学医学院附属医院分子生物研究室
59
195
8.0
11.0
4
刘相萍
青岛大学医学院附属医院分子生物研究室
61
180
7.0
8.0
5
罗文娟
青岛大学医学院附属医院眼科
9
25
3.0
4.0
6
胡丽婷
青岛大学医学院附属医院眼科
52
190
7.0
11.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(94)
共引文献
(13)
参考文献
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节点文献
引证文献
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同被引文献
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二级引证文献
(0)
1974(2)
参考文献(0)
二级参考文献(2)
1985(3)
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1986(3)
参考文献(0)
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1987(1)
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转染
内皮细胞
角膜
聚合酶链反应
组织构建
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研究来源
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研究去脉
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期刊影响力
中国组织工程研究
主办单位:
中国康复医学会
《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
出版周期:
旬刊
ISSN:
2095-4344
CN:
21-1581/R
开本:
大16开
出版地:
沈阳浑南新区10002信箱
邮发代号:
8-584
创刊时间:
1997
语种:
chi
出版文献量(篇)
55677
总下载数(次)
80
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
期刊文献
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