乳杆菌电转化条件的优化

• 作者: 夏子芳 张梁 王正祥 石贵阳 陈卫
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 医学
• 关键词: 植物乳杆菌 噬淀粉乳杆菌 pHY300PLK 电转化
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 205-209
• 页数: 5页
• 分类号: R378.99
• 字数: 4063字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2008.02.040

摘要

乳杆菌的遗传转化是限制对其遗传操作的关键因素之一.本实验用广宿主质粒pHY300PLK电转化植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)B0080,并优化了转化条件.系统地考察了细胞的生长时期、生长培养基组分、质粒浓度、电击时电场强度、复苏培养基组分等因素对转化效率的影响.选择含5.13%甘氨酸和0.54mol/L蔗糖的MRS培养基制备乳杆菌受体细胞,加入500ng质粒DNA,在电场强度7.41kV/cm电击转化,以含有0.3mol/L蔗糖的MRS培养基复苏培养,获得最佳转化率为3.6×104CFU/μg DNA,比使用初始方法得到的转化率提高了40倍.采用优化后条件,同样实现了pHY300PLK、pBBR1MCS-5对L.amylovoru s B0112和L.acidophilus B0068的高效转化,为进一步对这些菌株进行基因工程改造奠定了有利的方法学基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王正祥	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	120	1443	20.0	31.0
2	石贵阳	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	128	1034	17.0	24.0
3	陈卫	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	321	2250	22.0	31.0
4	张梁	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	86	530	12.0	16.0
5	夏子芳	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	17	1.0	1.0