骨形态发生蛋白6对体外培养组织工程软骨的影响

• 作者: 丁超 朱立新 李奇 林荔军 陈伟义 韦葛竟
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 关节软骨细胞 纤维蛋白胶 生长因子
• 年，卷（期）: 2008,（33）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 6426-6429
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 4614字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.33.004

摘要

背景:研究表明,骨形态发生蛋白复合物可促进软骨细胞的分化与基质的分泌,并影响软骨细胞的成熟与分化,其中以骨形态发生蛋白6作用明显.目的:拟观察骨形态发生蛋白6对体外培养组织工程软骨的影响.设计、时间及地点:以细胞为观察对象的体外实验,于2006-01/2007-06在南方医科大学珠江医院中心实验室完成.材料:3周龄新西兰幼兔,体质量2.5 kg)用于采集软骨细胞.方法:以软骨细胞为种子细胞种植于改良纤维蛋白胶支架上,构建细胞改良支架复合物,体外培养,各培养孔内分别随机加入含2.5 g/L骨形态发生蛋白6的F12完全培养液或空白F12完全培养液2.0～3.0 mL.细胞支架复合物培养的第1～7天,每日骨形态发生蛋白6组和空白组中均随机取3孔标本,锥虫蓝染色,计活细胞数,绘制生长曲线.取1 g氨基己糖盐酸盐加蒸馏水至100 mL,随机选取部分组织工程软骨块,精确称取每份标本湿重各0.05 g,冷却后读取吸光度(A530)值.主要观察指标:苏木精-伊红染色、Alcian blue染色,光学显微镜下观察细胞生长、分化及支架降解情况.每组于培养的第7天和第14天,分别取12块标本,测细胞支架复合物质量.利用标准曲线计算出每份样品中的氨基己糖含量.结果:苏木精-伊红染色可见软骨细胞在纤维蛋白胶的空泡内贴壁样生长,部分细胞聚集成团.两组切片Alcian blue染色可见胞外基质蓝染,提示有酸性粘多糖的分泌.两组细胞生长速度无明显差异,空白组细胞倍增时间为5.0 d,骨形态发生蛋白6组为4.7d.细胞支架复合物质量测量结果显示骨形态发生蛋白6组为(135.13±0.64)mg,空白组为(117.87±0.37)mg,说明骨形态发生蛋白6组支架降解速度显著慢于空白组(P<0.05).骨形态发生蛋白6组氨基已糖含量为(72.06±1.11)mg/g,与空白组(67.12±1.83)mg/g相比,差异具有显著性意义(P<0.01),提示骨形态发生蛋白6组细胞外基质分泌较空白组多.结论:骨形态发生蛋白6可以促进体外培养在纤维蛋白胶软骨模块中的关节细胞分泌细胞外基质,从而有利于组织工程软骨的体外构建.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱立新	南方医科大学珠江医院骨科中心	66	316	9.0	12.0
2	李奇	南方医科大学珠江医院骨科中心	58	421	11.0	17.0
3	林荔军	南方医科大学珠江医院骨科中心	73	481	13.0	17.0
4	丁超	南方医科大学珠江医院骨科中心	10	52	4.0	7.0
5	陈伟义	南方医科大学珠江医院骨科中心	8	65	6.0	8.0
6	韦葛竟	南方医科大学珠江医院骨科中心	1	4	1.0	1.0