黄萎病菌诱导下陆地棉抗病品种SSH文库的构建

• 作者: 孙艳香 张桂寅 玄兆伶 王文生 王省芬 田海燕 马峙英
• 来源期刊: 棉花学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 黄萎病 SSH文库 抗病基因
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与进展
• 页码范围: 3-8
• 页数: 6页
• 分类号: S562.032
• 字数: 3777字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-7807.2008.01.001

摘要

采用抑制差减杂交技术,构建了陆地棉抗病品种冀棉20经黄萎病菌诱导8 h、12 h、24 h、48 h后的混合SSH文库,文库共包含800个阳性克隆.对质粒的酶切和巢式PCR结果表明,插入片段大小平均为400 bp.随机挑选20个阳性克隆进行测序,利用BLASTn和BLASTx进行序列相似性分析,发现20条EST都可以找到功能已知的同源序列,其中在BLASTn比较结果中,功能已知的有12条,占全部EST的60%;BLASTx的比较结果中有14条功能已知,占全部EST的70%.这些同源序列涉及到10种与抗病防御相关的基因,包括丝氨酸/苏氨酸激酶、谷胱甘肽-S-转移酶、乙醇脱氢酶、细胞色素P450、ACC氧化酶等.将这些序列与GenBank dbEST库进行比对,发现75%的EST都可以找到同源性较高的序列,它们都来自于植物在生物与非生物胁迫条件下特异表达的cDNA文库,这些胁迫包括病原菌诱导、低温处理、紫外线照射、热激处理、盐处理、氧胁迫、水杨酸诱导等.