转录靶向猪瘟病毒3′-UTR shRNA细胞株干扰猪瘟病毒增殖的检测

• 作者: 党如意 冶贵生 张为民 张彦明 徐浩 熊奎州 谢林红 郭抗抗
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 半定量RT-PCR ELISA 猪瘟病毒 3′-UTR
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 746-751
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65+1
• 字数: 4005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.06.011

摘要

对筛选的转录猪瘟病毒石门株3′-UTR shRNA的PK-15细胞株P-1(114～132位)、P-2(136～154位)和P-3(209～227位)分别接种猪瘟病毒(CSFV),在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CSFV NS3基因及β-actin基因,以研究构建细胞株在转录水平上对CSFV增殖干扰的效果;接毒后第72、96和148小时以酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测细胞NS3蛋白表达量,通过OD490值分析构建细胞株在病毒蛋白表达水平上对CSFV增殖的影响.检测结果表明:(1)接毒后第72和96小时P-1、P-2和P-3细胞株中NS3基因的量明显减少,与接毒的空白PK-15细胞比较差异显著(P<0.05),说明P-1、P-2和P-3细胞株转录的shRNA能干扰CSFV RNA的转录;(2)接毒后第72和96小时P-1、P-2、P-3细胞株中NS3蛋白的表达量明显少于接毒的PK-15细胞(P<0.05),说明转录的shRNA在病毒蛋白水平上能干扰CSFV NS3基因的表达,但接毒后第148小时干扰效果有所降低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦明	西北农林科技大学动物医学院	256	1530	16.0	24.0
2	郭抗抗	西北农林科技大学动物医学院	109	484	12.0	16.0
3	党如意	西北农林科技大学动物医学院	33	130	7.0	9.0
4	张为民	西北农林科技大学动物医学院	60	436	11.0	18.0
5	熊奎州	西北农林科技大学动物医学院	5	8	2.0	2.0
6	冶贵生	西北农林科技大学动物医学院	9	66	3.0	8.0
7	谢林红	西北农林科技大学动物医学院	3	8	2.0	2.0
8	徐浩	西北农林科技大学动物医学院	6	43	4.0	6.0