儿童急性白血病WT1基因表达的临床意义

• 作者: LUO Chang-ying 汤静燕 胡文婷
• 来源期刊: 临床儿科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: WT1基因 质粒 实时定量聚合酶链反应 急性白血病 儿童
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 血液系统疾病专栏
• 页码范围: 655-659
• 页数: 5页
• 分类号: R733
• 字数: 3662字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3606.2008.08.003

摘要

目的 构建WT1质粒,建立实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)监测儿童白血病骨髓样本WT1基因的实验方法,初步研究WT1基因在儿童白血病中的表达特点及临床意义.方法 设计合成WT1基囚引物探针,利用分子克隆方法构建含有目的 基因WT1片段的质粒,并以此作为阳性对照检测儿童白血病骨髓样本.通过Taqman荧光探针RQ-PCR方法分别对WT1目的 基因及GAPDH内参基因进行检测,利用双标准曲线法对WT1基因的表达水平进行绝对定量,检测结果用WT1与GAPDH基因拷贝数比值(WT1/104·GAPDH)表示.实验结果应用SPSS 13.0软件进行统计学处理.结果 经酶切电泳和测序分析证实构建的质粒中成功插入了WT1基囚片段,作为RQ-PCR方法中的阳性对照;成功建立了WTl摹因的RQ-PCR检测方法.对儿童白血病标本的检测结果显示:初发AML患儿WT1基因表达水平(9.2331±37.6228)明显高于正常对照组(0.0482±0.0348),其次为BCR-ABL阳性的CML患儿(0.1080±0.0616),初发ALL患儿WT1基因表达水平(0.0605±1.6124)与正常组的差异无统计学意义.缓解中的AML患儿WT1基因表达水平(0.3150±0.7216)较初发时明显下降(P=0.000).结论 实验构建的WT1质粒及建立的RQ-PCR方法可用于儿美童白血病WT1基因检测.WT1基囚的表达水平在一定意义上可作为儿童AML治疗过程中肿瘤负荷的动态监测指标.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤静燕	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心血液肿瘤科	44	110	6.0	6.0
2	胡文婷	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心血液肿瘤科	5	16	2.0	4.0
3	LUO Chang-ying	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心血液肿瘤科	1	6	1.0	1.0