植物源内含子对GUS基因表达模式的影响

• 作者: 卢长明 吴刚 武玉花 聂淑晶 肖娜 肖玲 邹智
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: GUS 内含子 表达模式 根癌农杆菌 甘蓝型油菜 瞬间表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 78-82
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 字数: 4612字
• 语种: 中文

摘要

采用报告基因的瞬间表达来优化转化体系是提高农杆菌介导法转化效率的重要手段,GUS以稳定、易于定性定量分析等独特优点成为瞬间表达体系的首选.pCaMV 35S启动下的GUS基因可在农杆菌中表达,另外还首次报道该嵌合基因同时也可在大肠杆菌中高效表达.为避免GUS基因在农杆菌中的表达对瞬间表达体系的影响,一拟南芥蛋白基因的内含子被插入到GUS基因的编码区,进而构建了含内含子的GUS植物表达载体pB1121-GUSint.组织化学染色结果表明,GUSint在农杆菌中没有表达,而在接种3d的油菜中可高效瞬间表达,其中在子叶柄(带子叶)中瞬间表达率高达100%,这一方面证实载体构建成功,另一方面也为进一步优化油菜及其它芸薹属植物转化体系及在油菜中快速研究目的基因的功能和表达调控模式奠定了基础.