二温式PCR在特异短核酸探针合成中的应用

• 作者: 叶冰莹 董倩 陈如凯 陈由强 黄国强
• 来源期刊: 花生学报
• 学科: 农学
• 关键词: 二温式PCR 花生 白藜芦醇合酶 核酸探针
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告与简报
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: S565.2|Q784
• 字数: 3973字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-4093.2008.03.002

摘要

经基因库序列比对确定花生白藜芦醇合酶基因(RS)中的特异序列(长度约108 bp).以此为模板设计分别含有Sal I和Sac I酶切位点的一对上、下游引物,并应用二温式PCR扩增得到该特异短片段.将该特异片段正向连接到pBIueskriptIIKs(+)的多克隆位点上,利用T7 RNA聚合酶在体外转录合成地高辛标记的反义特异短核酸探针.该特异短核酸探针的合成为后续RS基因在花生组织器官中表达的RNA原位杂交研究打下了基础.