含gfp植物转基因表达载体的构建及在矮牵牛转基因不定根中的高效表达

• 作者: 向太和 徐纪明
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 绿色荧光蛋白基因 表达载体 构建 转基因 不定根
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1069-1074
• 页数: 6页
• 分类号: Q94
• 字数: 3885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2008.08.020

摘要

利用pBIN19、pGFP和pCHS质粒,成功构建了CaMV 35S启动子驱动的gfp基因的植物转基因表达载体pBIN-35S-GFP,并导入野生型发根农杆菌K599.矮牵牛的转化实验表明,矮牵牛离体叶片被发根农杆菌K599(带pBIN-35S-GFP质粒)感染生根率达45%.对诱导的不定根基因组DNA的PCR检测表明,不定根基因组中含有发根农杆菌K599 Ri质粒中的rolB基因和外源gfp基因;转基因不定根在蓝色光激发下能发出强烈的绿色荧光,表明构建的转基因载体pBIN-35S-GFP能实现gfp基因的高效表达.该载体在CaMV 35S启动子的两端各有一个多克隆位点,可以方便地进行启动子替换,用于研究不同启动子的功能.此外,该载体在gfp基因的5'端含有多克隆位点,在3'端含有EcoR I和Bsm I两个单一酶切位点,可以方便地在5'端连接上目标基因,表达含GFP的融合蛋白,进行目标基因编码蛋白的亚细胞定位;也可以方便地切除gfp基因,连上需要的目的基因进行转化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	向太和	杭州师范大学生命与环境科学学院	32	321	10.0	16.0
2	徐纪明	杭州师范大学生命与环境科学学院	4	47	3.0	4.0