程序性坏死参与铝致神经母细胞瘤细胞死亡机制

• 作者: 张勤丽 张玲 牛侨 王亮
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 程序性坏死 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 necrostatin-1 细胞死亡 神经系统中毒"铝
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 382-390
• 页数: 9页
• 分类号: R99
• 字数: 7331字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2008.05.010

摘要

目的 探讨程序性坏死(necroptosis)在铝致神经细胞死亡中的作用,以完善铝致神经细胞死亡的机制研究.方法 用4 mmol·L-1 AlCl3·6H2O染毒神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y制作铝致神经细胞死亡模型,用RNA干扰技术(RNAi)抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3基因的表达;用程序性坏死的特异性阻断剂necrostatin-1(Nec-1)抑制程序性坏死的产生.检测不同处理、处理后不同时间点细胞的活力变化,荧光定量PCR法检测RNAi效率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率及坏死率改变,免疫组织化学法检测蛋白表达量的差异.结果 通过细胞活力在不同小干扰RNA(siRNA)序列、不同转染剂量、不同作用时间点的变化,找到其最适转染浓度为10 nmol·L-1,最适作用时间为转染后48 h.通过RNAi抑制caspase 3基因表达的差异,筛选出最有效序列为caspase 3 siRNA 1序列;荧光染色并观察计数表明caspase 3 siRNA的转染效率为93.0%, 其干扰效率为63.0%, 对caspase 3蛋白表达有显著的阻抑效应. Caspase 3 siRNA单独作用于染铝SH-SY5Y细胞,可以显著提高细胞活力,降低其凋亡率;Nec-1单独作用于染铝SH-SY5Y细胞可以显著提高其细胞活力,降低细胞坏死率;共同作用在染铝SH-SY5Y细胞时两者有增强作用,可以显著提高细胞活力,并同时降低SH-SY5Y细胞的凋亡率及坏死率.结论 在铝致神经细胞死亡的机制中,除了传统上认为的凋亡和坏死途径外,还有程序性坏死的存在.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牛侨	山西医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室	184	1280	17.0	25.0
2	张玲	山西医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室	83	445	11.0	16.0
3	张勤丽	山西医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室	51	370	10.0	17.0
4	王亮	山西医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室	8	32	4.0	5.0