c-Myc转基因小鼠构建的改良方法

• 作者: 任红艳 唐中林 崔文涛 张兴举 李奎 杨述林
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 人角蛋白K14 转基因小鼠 c-Myc基因 皮肤特异表达
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 37-40
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 2294字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.01.007

摘要

以CMV-PAAV载体为基础载体,以皮肤特异人K14(人角蛋白14)基因启动子替换原质粒中的CMV启动子后,在其多克隆位点区插入鼠c-Myc基因的cDNA序列和GFP编码序列,构建成高效表达c-Myc基因的真核表达载体.通过双原核显微注射技术,将线性化的载体DNA注入到C57BL6近交系小鼠(Mus musculus)受精卵的2个原核中,将注射后状态良好的胚胎移植到代孕鼠的输卵管中,共移植了200枚受精卵,6只受体怀孕,最终获得44只成年小鼠.通过PCR和Southern blot分析证明,2只为阳性转基因小鼠,转基因阳性率为4%.Southern blot结果分析显示,外源片段是以多拷贝串联重复的形式整合到鼠染色体中.