草鱼肝细胞中CYP2E1活性的诱导研究

• 作者: 喻文娟 张宁 杨先乐 王翔凌 胡鲲
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 反相高效液相色谱法 草鱼肝细胞 CYP2E1 氯唑沙宗 诱导
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 469-474
• 页数: 6页
• 分类号: Q55
• 字数: 4751字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3207.2008.04.004

摘要

CYP2E1为代谢大部分药物及环境中毒物的关键酶.以草鱼肝细胞(Ctenopharyngodon idellus hepatocyte)为反应体系,选取氯唑沙宗(CZX)为底物,采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定其产物6-OH-氯唑沙宗(HCZX)的量,Lowry法测定肝细胞中蛋白的浓度从而反映CYP2E1活性,并采用该酶特异性诱导剂乙醇对其进行诱导,观察其酶活变化及CZX在细胞中代谢情况.结果表明,CZX在草鱼肝细胞中的基础代谢较低,经过对CYP2E1诱导条件的优化及筛选,得到最佳诱导剂剂量为4μg/mL、诱导时间为24h、底物浓度为50μg/mL并且孵育时间为1h时,其酶活达到最高.约为0.47μg/min·mg.对照组和诱导组的草鱼肝细胞中CZX的消除半衰期(t1/2)分别为202.10h和28.75h,差异极显著,表明乙醇诱导的CYP2E1能够加快底物的代谢.酶促反应动力学参数表明乙醇诱导的CYP2E1与底物的亲和力较高,酶促反应强度较大.该结果能够为CYP2E1代谢的药物及环境毒物的研究提供理论依据.