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摘要:
综合多种细菌、真菌DNA模板的提取方法,采用β-巯基乙醇裂解细胞壁,利用蜗牛酶和溶菌酶消化细胞壁,再利用石英砂机械破壁,能彻底破坏细菌、真菌细胞壁,提取高质量的DNA,摸索出一套从奶样中同时提取细菌、真菌核酸的新方法.建立双重PCR方法,同时完成对细菌16S rRNA保守区特异性基因片段和真菌18S rRNA保守区特异性基因片段的扩增,快速诊断奶牛乳房炎是细菌感染还是真菌感染或是混合感染.对采自临床型乳腺炎和隐性乳腺炎病例的共计84个乳样分别用传统细菌学培养法和双重PCR方法对比鉴定.结果表明,双重PCR检测乳样细菌的最小浓度为102 CFU/mL,检测乳样真菌的最小浓度为103 CFU/mL.双重PCR方法对细菌的检测与平板培养检测方法比较差异不显著(P>0.05),对真菌的检测与平板培养检测方法比较具有更高的检出率(P<0.01).
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文献信息
篇名 快速鉴别奶牛乳腺炎细菌或真菌的双重PCR方法
来源期刊 畜牧兽医学报 学科 农学
关键词 奶牛乳腺炎 细菌 真菌 双重PCR
年,卷(期) 2008,(11) 所属期刊栏目 预防兽医
研究方向 页码范围 1554-1561
页数 8页 分类号 S858.23|S857.26
字数 5774字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.11.017
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 蔡玉梅 山东农业大学动物医学院 35 231 10.0 14.0
2 柴同杰 山东农业大学动物医学院 161 1763 23.0 34.0
3 李晓霞 山东农业大学动物医学院 15 68 5.0 8.0
4 马保臣 山东农业大学动物医学院 40 512 13.0 22.0
5 戈胜强 山东农业大学动物医学院 6 56 4.0 6.0
6 王炳晓 山东农业大学动物医学院 2 14 1.0 2.0
7 吕静 山东农业大学动物医学院 5 27 3.0 5.0
8 乔孛贩 山东农业大学动物医学院 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
奶牛乳腺炎
细菌
真菌
双重PCR
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畜牧兽医学报
月刊
0366-6964
11-1985/S
大16开
北京海淀区圆明园西路2号
82-453
1956
chi
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