抑制生长因子受体连接蛋白-2表达对乳癌细胞生长的影响

• 作者: 刘枋 叶韵斌 李洁羽 陈强 陈慧菁
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,生长因子 RNA干扰 乳腺肿瘤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 55-62
• 页数: 8页
• 分类号: Q78|R979.1
• 字数: 5709字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2008.01.009

摘要

目的 进一步验证生长因子受体连接蛋白-2(Grb2)的表达在乳癌发展中的作用.方法 应用脂质体转染技术将Grb2小干扰RNA(siRNA)转染至乳癌细胞SKBr3中,台盼蓝计数法测定存活细胞数, TUNEL技术和Annexin Ⅴ/PI染色分析转染后细胞的凋亡,免疫细胞化学技术分析转染后细胞Grb2的表达.Western蛋白质印迹法测定Grb2、细胞外信号调节激酶 (p42/44 ERK)、磷酸化p42/44 ERK(P-p42/44 ERK)、原癌基因蛋白质c-akt(Akt)、磷酸化Akt(P-Akt)和STAT 5转录因子表达的改变.流式细胞术检测细胞活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3的表达.结果 台盼蓝计数法结果显示,转染Grb2 siRNA可有效抑制SKBr3的生长.TUNEL实验显示,Grb2 siRNA转染SKBr3细胞后,随着时间延长,凋亡细胞明显增加.Annexin Ⅴ/PI测定结果亦提示,Grb2的抑制可明显诱导SKBr3细胞凋亡.转染48 h后,SKBr3的活化caspase 3表达水平由0.99%升至17.43%.免疫组化染色表明,Grb2 siRNA转染细胞后,SKBr3细胞Grb2表达明显下降,由转染24 h后的下降至转染72 h后的+～-.Western蛋白质印迹分析证实,Grb2的抑制可导致SKBr3细胞P-p42/44 ERK,P-Akt以及STAT 5表达明显下降.P-p42 ERK与p42 ERK的相对吸光度值之比由未转染的(60±17)%下降至转染24 h后的(38±13)%,及转染48 h后的(21±8)%;P-p44 ERK与p44 ERK的相对吸光度值之比, 由未转染时(104±16)%,分别下降至(49±13)%及(30±10)%;P-Akt与Akt的相对吸光度值之比由未转染的(40±6)%下降至(32±10)%和(15±4)%.与未转染组相比,转染24及48h后STAT 5相对吸光度值分别下降为(64±6)和(52±14)%.结论 抑制Grb2的表态抑制乳癌细胞生长并诱导细胞调亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶韵斌	福建医科大学福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室	17	68	5.0	7.0
2	陈强	福建医科大学福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室	61	211	8.0	11.0
3	陈慧菁	福建医科大学福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室	6	19	2.0	4.0
4	刘枋	福建医科大学福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室	2	10	1.0	2.0
5	李洁羽	福建医科大学福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室	5	31	2.0	5.0