重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体的稀释复性

• 作者: 刘步云 吴明刚 姚忠 邓海霞 黄东健
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶 稀释 包涵体 重组 复性
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 74-78
• 页数: 5页
• 分类号: Q814
• 字数: 4039字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2008.03.014

摘要

N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶(N-Acetylornithine deacetylase,NAO)是一种重要的用于手性拆分的酶,具有广泛的底物选择性,常用于多种活性氨基酸的酶法拆分.采用稀释复性法研究了重组NAO包涵体的复性条件,如蛋白浓度、复性液中尿素浓度、pH、GSH浓度及c(GSH)/c(GSSG)比例,同时对稀释操作方式进行了考察,得到了较为适宜的复性条件.结果表明,尿素能有效抑制复性过程中蛋白质的聚集,随着蛋白质浓度的增加,复性效果变差.当复性缓冲液中尿素浓度为2 mol/L,GSH浓度为5 mmol/L,c(GSH)/c(GSSG)为2.5,pH为8.5,在4 ℃下进行分批稀释复性操作,复性后重组NAO的活性为1.077 U/mL,比酶活达到14.943 U/mg,与可溶性表达的NAO比较,复性率达到21.48%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚忠	南京工业大学制药与生命科学学院	74	446	11.0	16.0
2	吴明刚	南京工业大学制药与生命科学学院	6	39	3.0	6.0
3	黄东健	南京工业大学制药与生命科学学院	2	4	2.0	2.0
4	刘步云	南京工业大学制药与生命科学学院	4	81	2.0	4.0
5	邓海霞	南京工业大学制药与生命科学学院	2	16	2.0	2.0