人脐血间充质干细胞在体外向肝样细胞的诱导分化

• 作者: 张洹 迟作华 陆琰
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胎血 间质干细胞 细胞分化 肝细胞
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 159-163
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4606字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2008.03.008

摘要

目的 探讨脐血间充质干细胞(MSCs)在体外能否分化成肝细胞.方法 分离人脐血MSCs,培养传代,流式细胞仪进行细胞表面标志检测.取培养至第三代的细胞,接种于六孔板内,分两个阶段进行细胞分化的诱导,第一阶段采用含地塞米松(终浓度为0.5 μmol/L,下同)、肝细胞生长因子(HGF,10 ng/ml)、表皮生长因子(10 ng/ml)及1×ITS(胰岛素-转铁蛋白-硒)的F12培养基诱导2周,第二阶段用含地塞米松(0.5 μmol/L)、HGF(10 ng/ml)、抑瘤素M(10 ng/ml)及1×ITS的F12培养基继续诱导2周.诱导期间于倒置显微镜下观察细胞的形态变化;采用逆转录聚合酶链反应检测分化细胞的甲胎蛋白(AFP)、白蛋白、人细胞角蛋白18(CK-18)及酪氨酸氨基转移酶(TAT)基因的表达,以免疫荧光染色法检测分化细胞胞浆中AFP、白蛋白、CK-18的表达;用电子显微镜观察分化细胞的超微结构.结果 培养的脐血MSCs不表达CD14、CD34及CD45,也不表达CD49f、CD54及HLA-DR;部分表达CD106;强表达CD13、CD29及CD44.未分化的脐血MSCs不表达AFP、TAT及白蛋白基因,弱表达CK-18基因;诱导分化1周后可检测到AFP基因的表达,诱导分化4周后,不仅表达AFP、CK-18和白蛋白基因,还表达TAT基因.免疫荧光染色显示,未分化的MSCs胞浆中无AFP、白蛋白及CK-18的表达;分化细胞则可以检测到上述物质的表达.诱导至第4周的分化细胞,可见核仁大且明显,细胞核周围有板层状的内质网,胞浆中可见脂滴及簇状糖原,线粒体丰富,细胞表面有微绒毛.结论 脐血MSCs在合适的诱导条件下可以分化为肝样细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洹	暨南大学医学院血液病研究所	219	1146	17.0	21.0
2	迟作华	广东药学院临床医学院附属第一医院血液内科	12	86	5.0	9.0
3	陆琰	暨南大学医学院血液病研究所	16	155	7.0	12.0