烟草花叶病毒运动蛋白的表达及特异性抗体制备

• 作者: 吴祖建 张正坤 林奇英 沈建国 谢联辉
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 烟草花叶病毒 运动蛋白 融合蛋白表达 抗体 Western-blot检测
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 265-268
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

从烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)感染的发病烟草叶片中提取总RNA,通过RT-PCR扩增得到其运动蛋白基因,将扩增产物克隆到pMD18-T载体上.DNA序列分析表明,所得运动蛋白基因全长为807 bp,与已报道的TMV-U1株系核苷酸和氨基酸同源性均为100%.将目的基因亚克隆到原核表达载体pET-29a上,并转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导4 h后蛋白表达量达到最大,超声波显示所得融合蛋白以不可溶形式存在.SDS-PAGA检测蛋白表达情况,表达产物与目的蛋白大小一致,割胶免疫注射家兔得到抗体,ELISA测定效价为25600,Western-blot检测证明在烟草叶片被侵染早期MP得到表达,且抗体特异性良好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林奇英	福建农林大学植物病毒研究所	152	2641	29.0	42.0
2	谢联辉	福建农林大学植物病毒研究所	184	3024	29.0	43.0
3	吴祖建	福建农林大学植物病毒研究所	166	2128	26.0	36.0
4	沈建国	福建农林大学植物病毒研究所	10	307	7.0	10.0
6	张正坤	福建农林大学植物病毒研究所	3	56	3.0	3.0