大口黑鲈原代肝细胞的培养及其应用于CYP450活性的诱导

• 作者: 喻文娟 张宁 李聃 杨先乐 王翔凌 邱军强
• 来源期刊: 海洋渔业
• 学科: 生物学
• 关键词: 大口黑鲈 肝细胞 原代培养 乳酸脱氢酶 白蛋白 氨基比林-N-脱甲基酶
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 31-36
• 页数: 6页
• 分类号: Q593.1
• 字数: 4053字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-2490.2008.01.006

摘要

体外培养大口黑鲈(Micropterus salmoides)原代肝细胞,观察其在培养过程中的形态变化,同时检测培养上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、白蛋白(ALb)含量,从而判定肝细胞的增殖和代谢能力,进而应用于CYP450的诱导研究.结果表明:培养5 d后,肝细胞连接成片,分裂增多;培养至7 d,细胞渐至单层;14 d后,细胞停止生长,出现老化迹象.培养至第3～4天的细胞上清液中LDH的渗出量呈上升趋势,在第4天时达到峰值,随着培养时间的延长,肝细胞的酶渗出量逐渐减少.ALb的分泌量在第3～5天呈上升的趋势,第4～8天维持在较高水平,在第5天达到最高,此后随着培养时间的延长,ALb的分泌量呈下降趋势,故选择培养至第5天的大口黑鲈肝细胞应用于CYP450酶系中的氨基比林-N-脱甲基酶(ANDM)的诱导研究.40 μM利福平诱导24 h后,ANDM活性最高.ANDM的诱导研究为鱼类细胞药物代谢酶体外诱导奠定基础.