棕色固氮菌细菌铁蛋白捕获能力、稳定性和亚基相互作用的强度

• 作者: 林青 罗联忠 陈旭 黄河清 黄琳
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 细菌铁蛋白 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 电泳 亚基 相互作用 稳定性 捕获能力
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1045-1050
• 页数: 6页
• 分类号: O6
• 字数: 5382字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3820.2008.08.007

摘要

选用柱层析、电泳和反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术制备质谱纯棕色固氮菌细菌铁蛋白(Bacterial ferritin of Azotobacter vinelandii, AVBF), 并采用释放铁动力学和肽质量指纹图谱(Peptide mass fingerprinting, PMF)技术分别鉴定AVBF.基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS)和电泳技术揭示AVBF亚基之间相互作用强度、稳定性和聚合态.AVBF可直接捕获有机小分子亚甲蓝(MB),其捕获率为15.0±2.0 MB/AVBF,认为介于AVBF亚基单体之间的血红素参与捕获MB.较高浓度(40%～50%)的乙腈和丙酮均能使AVBF和鲨鱼肝铁蛋白( Liver ferritin of shark,SLF) 释放不稳定亚基,但在较低浓度(20%～30%)的乙腈条件下,却需要借助来源于质谱仪的激光才能使AVBF或SLF释放不稳定亚基,并供质谱分析.AVBF亚基之间的相互作用强度明显低于SLF.铁蛋白亚基之间的相互作用强度高低与铁蛋白执行释放和储存铁的速率有关.