RNA干扰抑制乙酰肝素酶对肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和凋亡的影响

• 作者: 刘楠 张清富 江黎黎 王恩华 邱雪杉 黄琴
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 RNA,小分子干扰 肝素裂合酶
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 826-830
• 页数: 5页
• 分类号: R9
• 字数: 4605字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-5807.2008.12.010

摘要

目的 探讨抑制乙酰肝素酶表达对人肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 构建靶向人乙酰肝素酶基因短发夹状双链RNA(shRNA)真核表达质粒(pshRNA-Hpa),用脂质体将其转入A549细胞,建立稳定转染细胞株系,经逆转录.PCR和Western blot法检测转染效率后,分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell侵袭实验和流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI双染法)检测其对A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.采用Western blot法检测转染后磷酸化蛋白激酶B(PKB/Akt-Ser473)的表达.结果 转染pshRNA-Hpa的A549细胞乙酰肝素酶mRNA及蛋白表达明显低于未处理A549细胞,抑制率分别为54.09%和48.26%,细胞增殖速度减缓,侵袭能力降低,流式细胞术显示早期细胞凋亡率达(12.53±0.34)%,较空白对照组、空载体转染细胞组和阴性对照组明显增加(P＜0.01).同阴性对照质粒相比,转染pshRNA-Hpa的A549细胞Akt-Ser473的磷酸化水平降低52.15%.结论 靶向乙酰肝素酶重组shRNA质粒pshRNA-Hpa能有效抑制A549细胞乙酰肝素酶的表达,并可能通过下调磷酸化蛋白激酶B途径抑制细胞的增殖侵袭、促进细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱雪杉	中国医科大学基础医学院病理学教研室附属第一医院病理科	75	443	11.0	15.0
2	王恩华	中国医科大学基础医学院病理学教研室附属第一医院病理科	135	892	13.0	23.0
3	刘楠	中国医科大学附属第一医院肾内科	50	210	9.0	11.0
4	张清富	中国医科大学基础医学院病理学教研室附属第一医院病理科	12	93	6.0	9.0
5	黄琴	江苏省金坛市人民医院病理科	1	9	1.0	1.0
6	江黎黎	中国医科大学基础医学院病理学教研室附属第一医院病理科	1	9	1.0	1.0