文昌鱼性腺差减cDNA文库的构建

• 作者: 刘晓慧 王义权 王秀
• 来源期刊: 动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 文昌鱼 性腺 差减cDNA文库 抑制性差减杂交
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 生理学和生物化学、细胞生物学及发育生物学、遗传学与分子生物学
• 页码范围: 482-488
• 页数: 7页
• 分类号: Q95
• 字数: 5030字
• 语种: 中文

摘要

本研究以日本文昌鱼(Branchiostoma japonicum)性腺cDNA为材料,应用抑制性差减杂交技术构建文昌鱼雌雄性腺的差减cDNA文库.正向差减杂交以卵巢为试验方、精巢为驱动方,反向差减杂交以精巢为试验方、卵巢为驱动方,将所获差减cDNA片段克隆插入质粒表达载体,转化大肠杆菌DH5α,最后获得的正、反向差减文库分别含459、243个重组子.PCR 扩增鉴定正、反向差减cDNA文库的插入片段,其中90%左右的克隆皆能扩增出有效产物,插入片段范围为200-600 bp,符合差减文库PCR产物片段的大小.随机选取30个阳性克隆测序分析,得到26有效基因片段,进一步从中选取16个序列,用实时定量PCR对文库质量进行验证,结果表明所建文库能够达到富集雌雄性腺差异表达基因的目的.文昌鱼性腺差减文库的构建,为进一步分离、鉴定性腺分化和发育相关基因奠定了基础[动物学报 54(3):482-48 8,2008].

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王义权	厦门大学生命科学学院	42	856	16.0	28.0
2	刘晓慧	厦门大学生命科学学院	10	35	3.0	5.0
3	王秀	厦门大学生命科学学院	2	28	2.0	2.0