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增殖细胞核抗原突变体的稳定高表达对HeLa细胞顺铂敏感性的影响
增殖细胞核抗原突变体的稳定高表达对HeLa细胞顺铂敏感性的影响
作者:
位全芳
刘洋
周虎传
徐志刚
曾益军
杨劲
袁方
赵友光
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
增殖细胞核抗原
稳定转染
HeLa细胞
顺铂
摘要:
目的 建立稳定高表达增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)或突变体PC-NA(mutant PCNA,mPCNA)目的蛋白的宫颈癌细胞系HeLa细胞,观察PCNA在顺铂诱导的DNA损伤修复中的作用.方法 采用显性负突变策略,通过构建重组人PCNA或mPCNA的真核表达质粒pCDNA3.1/V5-His A-PCNA(His-PCNA)和pCDNA31/V5-His A-mPCNA(His-mPCNA),稳定转染到HeLa细胞中,G418筛选建立稳定高表达目的蛋白的HeLa细胞系;Western印迹法检测蛋白的表达情况;MTT法测定顺铂损伤后不同细胞系的细胞存活率.结果 真核表达质粒经酶切、测序分析与实验设计完全一致;稳定建系后,Western印迹结果显示在相应位置可见清楚的目的条带;MTT结果显示稳定高表达突变体PCNA的细胞系与对照组相比,其细胞存活率呈明显下降趋势.结论 成功构建了真核表达质粒His-PCNA和His-mPC-NA;建立了稳定高表达该质粒的HeLa细胞系;稳定高表达突变体PCNA的细胞系对顺铂损伤更敏感.
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文献信息
篇名
增殖细胞核抗原突变体的稳定高表达对HeLa细胞顺铂敏感性的影响
来源期刊
医学分子生物学杂志
学科
生物学
关键词
增殖细胞核抗原
稳定转染
HeLa细胞
顺铂
年,卷(期)
2008,(6)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
498-502
页数
5页
分类号
Q786
字数
3610字
语种
中文
DOI
10.3870/j.issn.1672-8009.2008.06.007
五维指标
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
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增殖细胞核抗原
稳定转染
HeLa细胞
顺铂
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
医学分子生物学杂志
主办单位:
华中科技大学同济医学院
出版周期:
双月刊
ISSN:
1672-8009
CN:
42-1720/R
开本:
大16开
出版地:
武汉市航空路13号
邮发代号:
38-35
创刊时间:
1978
语种:
chi
出版文献量(篇)
2127
总下载数(次)
4
总被引数(次)
8829
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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