RNA干扰Cyclin D1基因表达对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和G1期调控的影响

• 作者: 于冬梅 王冬艳 王慧冬 郝立君
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: 瘢痕疙瘩 RNA干扰 cyclin D1 CDK4 pRb P16 细胞周期
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 159-169
• 页数: 11页
• 分类号: Q522|Q786|R739.5
• 字数: 1404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2008.02.007

摘要

为研究siRNA干扰瘢痕疙瘩成纤维细胞cyclin D1基因表达,对瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖、细胞周期和G1期调控的影响,构建了靶向cyclin D1的siRNA表达质粒.利用LipofecmmineTM2000转染体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞,应用荧光定量PCR、RT-PCR检测cyclin D1 mRNA的干扰效果,应用MTT法、流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期的变化,应用免疫组织化学染色检测成纤维细胞中cyclin D1、CDK4、P16、pRb蛋白表达的影响.主要结果如F:a.靶向cyclin D1的特异性siRNA序列可以高效地抑制成纤维细胞cyclin D1基因表达,对照组与实验组在mRNA水平其表达抑制率分别为63.68%和92.83%(P<0.01);b.可以显著抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,改变细胞周期分布,G0/G1期细胞比例显著高于各对照组(P<0.05),细胞分裂被阻滞;c.免疫组化染色发现,转染72 h后,过表达的cyclin D1、CDK4和pRb蛋白,在瘢痕疙瘩成纤维细胞中均出现了不同程度的表达下调,而低表达的P16则呈上调表现.由上述结果可见,构建的靶向cyclin D1的RNAi表达质粒,可有效地抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞cyclin D1基因表达,通过改变Gl期相关周期蛋白的水平,影响G1/S期的进程,显著地抑制成纤维细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王冬艳	哈尔滨医科大学附属第二医院整形美容科	18	136	6.0	11.0
2	郝立君	哈尔滨医科大学附属第二医院整形美容科	74	369	11.0	14.0
3	于冬梅	哈尔滨医科大学附属第二医院整形美容科	25	202	8.0	13.0
4	王慧冬		8	18	2.0	3.0