分化抑制蛋白1在小鼠树突状细胞肉瘤细胞分化中的作用

• 作者: 冯海凉 刘玉琴 卞晓翠 顾蓓
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肉瘤,实验性 分化抑制蛋白1 RNA干扰 细胞分化
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 316-322
• 页数: 7页
• 分类号: R73
• 字数: 7078字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-5807.2008.05.007

摘要

目的 研究降低分化抑制蛋白1(Id.1)的表达在树突状细胞肉瘤(DCS)细胞分化中的作用.方法 通过RNA干扰技术来降低DCS细胞株中Id-l蛋白的表达,Western blot和real.timePCR分别检测该蛋白在蛋白水平和mRNA水平L的变化;倒置显微镜下观察降低Id.1蛋白表达后DCS细胞形态的变化;Casy细胞计数分析仪检测细胞大小的分布情况;流式细胞仪检测细胞周期的变化.通过Western blot和免疫组织化学检测树突状细胞的分化标志如Id-2、CD86、CDllc、MHC II的变化.生长曲线及四甲基偶氮唑盐(MTY)法检测DCS细胞的增殖情况的变化;通过TransweH和克隆形成率测定分别观察降低Id-1蛋白前后细胞侵袭、成瘤能力的变化.以不加siRNA的空白组和无关 对照siRNA作阴性对照,以诱导分化剂丁酸钠作为阳性对照.结果 降低Id-1蛋白表达后DCS细胞分枝增多,细胞体积明显增大,核质比下降,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.01),树突状细胞分化标志Id-2、CD86等表达上调,细胞增殖受到抑制,侵袭、成瘤能力减弱(P<0.01).结论 通过RNA干扰技术降低Id-1基因的表达,可以促进恶性实体肿瘤细胞的分化,降低恶性程度.