白斑综合征病毒与中国对虾血细胞膜的体外结合实验

• 作者: 刘宝良 唐小千 战文斌 林颖博 邢婧
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 白斑综合征病毒 血细胞膜 受体蛋白 阻断剂
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 页码范围: 788-793
• 页数: 6页
• 分类号: S945
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0615.2008.05.018

摘要

筛选小分子受体配基或抗受体蛋白的单克隆抗体作为阻断剂,是阻断病毒感染的有效途径.通过差速离心法提取海捕中国对虾血细胞膜,分别利用Dot-Blot和ELISA技术,将血细胞膜包被于硝酸纤维素(NC)膜或酶标板,使地高辛(Digoxigenin,DIG)标记的对虾白斑综合征病毒(WSSV-DIG)与之4℃结合4 h,并以碱性磷酸酶标记抗DIG抗体作为探针检测,实验结果皆为阳性,证明体外环境下WSsV能稳定地与血细胞膜结合.通过血细胞膜免疫Balb/c小鼠生产抗中国对虾血细胞多克隆抗体,以该多抗37℃孵育血细胞膜1 h,然后使WSSV-DIG与血细胞膜结合并检测.在Dor-Blot实验中,阻断组发色明显浅于未阻断组;在ELISA实验中,阻断组OD值比未阻断组降低69%.可以推断,多抗中抗血细胞受体的抗体与血细胞膜上的受体蛋白结合,占据了WSSV黏附蛋白的结合位点,从而显著地抑制了WSSV与血细胞膜的体外结合.实验所建立的WSSV与对虾血细胞膜体外结合技术可以应用于WSSV与血细胞受体蛋白的黏附特性的研究以及WSSV阻断剂的筛选,多抗阻断实验证明了本方法的可行性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐小千	中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室	31	124	6.0	9.0
2	战文斌	中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室	97	1155	20.0	30.0
3	邢婧	中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室	46	478	11.0	20.0
4	林颖博	中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室	1	3	1.0	1.0
5	刘宝良	中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室	1	3	1.0	1.0