光皮桦AFLP分子标记体系的建立

• 作者: 尤卫艳 朱玉球 童再康 黄华宏
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 农学
• 关键词: 光皮桦 DNA提取 AFLP反应体系
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 42-45
• 页数: 4页
• 分类号: S792.2
• 字数: 3892字
• 语种: 中文

摘要

为了建立光皮桦AFLP分子标记体系,利用SDS法、常规CTAB法和CTAB-硅珠法提取光皮桦(Betula luminifera H.Wink.)嫩叶DNA,并进行检测比较.结果显示,CTAB-硅珠法更适合光皮桦基因组DNA的提取,所得在基因组DNA纯度高OD值在1.8左右,适用于AFLP分析.利用AVLP分子标记技术,采用Mse I-EcoRI酶切组合,从64个引物组合中筛选出51个带型分布均匀、多态性高且分辨能力强的引物组合.同时,通过对比实验确定了光皮桦AFLP反应的最佳模板DNA用量为300ng、酶切时间4h和预扩增产物稀释倍数30倍等,优化了相关AFLP反应体系,为今后利用AFLP分子标记技术研究光皮桦野生居群的遗传多样性分析和分子遗传图谱的构建打下坚实的基础.