儿童骨髓间充质干细胞体外培养与富集效率的研究

• 作者: 周莉 张兰芳 方拥军 杨引 贲晓明 陆勤
• 来源期刊: 实用儿科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 分离 培养 儿童
• 年，卷（期）: 2008,（21）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1686-1688
• 页数: 3页
• 分类号: R725.5
• 字数: 2618字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-515X.2008.21.021

摘要

目的 比较密度梯度离心法和全骨髓培养法分离培养儿童骨髓间充质干细胞(BMSCs)获得的细胞纯度与克隆形成效率.方法 取等量抗凝的儿童骨髓分别以密度梯度离心法和全骨髓培养法分离培养BMSCs,传代至第3代分别计数2种方法所得BMSCs的细胞总数.流式细胞仪检测表面标记物及其纯度,对第5代BMSCs分别绘制生长曲线,全骨髓培养法培养至第6代流式细胞仪再检测表面标记物及其纯度.结果 2种方法均能有效培养出BMSCs,BMSCs强表达CD105及CD13.低表达CD34;3mL骨髓样本用全骨髓培养法扩增至第3代平均町获得3.15×107个细胞,而密度梯度离心法3mL骨髓只获得1.08×107个细胞,二者有显著性差异(P＜0.05);密度梯度离心法第3代BMSCs纯度达95%以上,全骨髓培养法第3代BMSCs纯度约85%,多次换液传至第6代纯度可达到95%以上;2种方法第5代BMSCs生长曲线近似,接种后0-3d为生长潜伏期,3-6d为对数牛长期,之后进入平台期,无显著性差异(P＞0.05).结论 密度梯度离心法分离培养BMSCs,可在短时间内获取纯度较高的BMSCs;全骨髓培养法分离培养BMSCs,可从少量标本获得最大数量的BMSCs,多次换液传代也可获得纯度较高的BMSCs.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贲晓明	南京医科大学附属南京市儿童医院血液科	41	327	11.0	15.0
2	方拥军	南京医科大学附属南京市儿童医院血液科	39	101	6.0	9.0
3	张兰芳	南京医科大学附属南京市儿童医院血液科	24	122	6.0	10.0
4	陆勤	南京医科大学附属南京市儿童医院血液科	33	130	6.0	10.0
5	周莉	南京医科大学附属南京市儿童医院血液科	37	170	7.0	12.0
6	杨引	南京医科大学附属南京市儿童医院血液科	10	39	3.0	6.0