人精子核完全裂解对RNA提取的影响

• 作者: LI Hong-gang XIONG Cheng-liang 丁晓芳
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 精子 RNA 实时聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 临床遗传学论著
• 页码范围: 465-468
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3607字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1003-9406.2008.04.024

摘要

目的 证实提取人精子RNA时,精子核完全裂解的重要性.方法 人精子液化后经Pereoll纯化,淋巴细胞分离液分离外周血自细胞用作对照.人精子和外周血白细胞RNA均用TRIzol和RNeasy Kit两种试剂提取,对于不同试剂提取的RNA,取相同细胞数的RNA用于逆转录,并用实时PCR检测两种提取方法的β-ACTIN mRNA 量,来反映所提取RNA的量.结果 RNeasy Kit能完全裂解人精子和外周血白细胞的细胞核,TRIzol能完全裂解外周血白细胞的细胞核,但不能完全裂解人精子核.对于人精子,RNeasy Kit和TRIzol提取RNA量分别为(149.8±24.5)和(35.3±4.0)ng/106精子(n=3),差异有统计学意义(P=0.01).而且这种差异不是由于提取试剂的提取效率造成的,因为对于外周血白细胞,RNeasy Kit提取RNA量还稍低于TRIzol[(765.5±229.8)和(958.8±201.0)ng/106细胞,n=3,P=0.168].结论 人精子核的完全裂解可显著增加精子RNA提取量,也间接说明精子核是人精子RNA存在的重要部位.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁晓芳	华中科技大学同济医学院附属协和医院生殖医学中心	15	59	4.0	6.0