栉孔扇贝精子膜蛋白的提取分离及初步鉴定

• 作者: 刘丽燕 刘志鸿 周丽青 杨爱国 王清印
• 来源期刊: 海洋水产研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 栉孔扇贝 精子膜蛋白 糖蛋白 脂蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 73-81
• 页数: 9页
• 分类号: Q344
• 字数: 6347字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7075.2008.02.012

摘要

通过SDS-PAGE电泳,从提取液的倍数、提取时间、Triton X-100的浓度、SDS的有无等4个方面对提取条件进行优化,确定栉孔扇贝精子膜蛋白的最佳提取条件是:将精液150 g离心去除精原细胞,0.1 mol/L PBS缓冲液清洗两次,0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液清洗两次,3 000 g离心10min(4℃)得精子悬液;然后向精子悬液中加入3倍体积含1%Triton X-100和0.1%SDS的膜蛋白提取液中冰浴振摇1.5 h;4℃,50 000 g离心15 min,收集上清精子膜蛋白溶液.SDS-PAGE电泳后,考马斯亮蓝R-250染色检测出22种膜蛋白,分子量在23～156 kDa之间,PAS染色检测出糖蛋白有13种,苏丹黑B染色检测出脂蛋白有12种,其中既为糖蛋白又为脂蛋白的有8种.此研究结果可为以后进一步分离纯化栉孔扇贝的精子膜蛋白,研究其在精子发生和受精过程中的功能及作用提供基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王清印	农业部海洋渔业资源可持续利用重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	25	365	12.0	18.0
2	杨爱国	农业部海洋渔业资源可持续利用重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	25	272	10.0	15.0
3	周丽青	农业部海洋渔业资源可持续利用重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	19	228	8.0	14.0
4	刘丽燕	农业部海洋渔业资源可持续利用重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	1	3	1.0	1.0