马γ-干扰素单克隆抗体的制备及其特性分析

• 作者: 刘光亮 吴东来 张维军 徐树兰 王群 白宇 童铁钢 肖一红
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马γ-干扰素 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: S188|S185
• 字数: 3340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.01.002

摘要

将原核表达的重组马γ-干扰素成熟蛋白(mEIFN-γ)免疫BALB/c小鼠(Mus musculus),经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,以昆虫杆状病毒表达系统获得的重组马γ-干扰素作为检测抗原进行间接ELISA检测,共筛选并最终得到了12株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株.利用间接免疫荧光(IFA)试验对12株单克隆抗体进行鉴定,结果证实所获得的12株细胞分泌的抗体均为针对马γ-干扰素的特异性抗体.单克隆抗体亚型鉴定结果显示,4株为IgG1、2株为IgG2a、3株为IgG2b和3株为IgM,而且所有单克隆抗体的轻链均为κ链.将此12株单克隆抗体分别与用原核系统分节段表达的重组马γ-干扰素GST-mEIFN-γ(1-84)>和GST-mEIFN-γ(80-146)>蛋白进行特异性ELISA检测,结果表明有7株单克隆抗体识别GST-mEIFN-γ(1-84)>,而另5株单克隆抗体与GST-mEIFN-γ(80-146)>发生反应,说明所获得的12株单克隆抗体至少针对2个或2个以上不同的抗原表位.