表达dsRNA的细菌提取液可抑制黄瓜花叶病毒对烟草的侵染

• 作者: 何明远 刘勇 张德咏 张战泓 成飞雪 朱春晖
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄瓜花叶病毒 RNA沉默 双链RNA表达 细菌 保护 病毒侵染
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 植物病害及其防治
• 页码范围: 304-311
• 页数: 8页
• 分类号: S4
• 字数: 5081字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0412-0914.2008.03.013

摘要

利用RT-PCR分别克隆了CMV P3613株系的RNA2片段、MP(movement protein)基因片段及CMV AN株系的CP(coat protein)基因片段.以CP基因为中间间隔序列,分别构建了含有RNA2片段和MP基因反向重复片段的原核表达载体.体外转录试验表明:两个载体转录后都能形成预期大小的dsRNA.经过IPTG诱导,在大肠杆菌HT115(DE3)菌株中可表达产生预期大小的核酸片段,经DNase和RNaseA消化处理,证实为dsRNA.将表达病毒基因dsRNA的细菌超声破碎后处理烟草,进行保护和治疗试验,结果表明:表达CMV MP基因和RNA2片段dsRNA的细菌破碎液能够诱导烟草对CMV产生抗性.接种病毒60d后,保护效果试验病株率分别为45%和60%,治疗效果试验病株率分别为75%和85%,而其他对照发病率均为100%.本研究结果证明了利用RNA沉默的原理,构建具有反向重复序列的原核表达载体,用细菌表达dsRNA的粗提取物可防治CMV对烟草的侵染.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张德咏		66	550	14.0	19.0
2	刘勇		106	928	17.0	23.0
3	成飞雪		21	289	9.0	16.0
4	张战泓		31	159	7.0	11.0
5	朱春晖		15	100	5.0	9.0
6	何明远		20	136	8.0	11.0