三种丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备及初步应用研究

• 作者: 吴小兵 张柯 李津 谭文杰 邓瑶 阮力
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 中和抗体 假病毒
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 287-294
• 页数: 8页
• 分类号: R373.1
• 字数: 7464字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2008.04.008

摘要

本研究构建携带HCV代表株H77(1a)、中国HeBei株(1b)以及JFH-1株(2a)丙型肝炎病毒完整的E1-E2包膜糖蛋白基因的表达质粒,间接免疫荧光法及Western blot验证了其在细胞膜(293细胞)上的正确表达.三种包膜质粒分别与慢病毒包装质粒pHR'CMV△8.2及携带EGFP报告基因的自灭活(Self-Inactivating,SIN)转移质粒pCS-CG共转染293FT细胞,产生三种不同基因型的丙型肝炎包膜感染性假型(pseudotyped)病毒颗粒,免疫荧光与Western blot分析验证了E1/E2包膜糖蛋白在假病毒颗粒上的表达与掺人,利用p24 ELISA法及感染性实验对HCV假病毒进行滴定.从上清中获得的HCV假病毒可以在体外感染肝癌细胞系Huh7及Huh7-CD81(且后者上的感染效率约为前者上的2～3倍);利用针对HCV E2蛋白的具有广谱交叉中和活性的单克隆抗体AP33建立了基于上述假病毒颗粒的丙肝病毒体外中和抗体滴定方法,并应用于丙型肝炎患者体内的中和抗体水平的研究.本研究成功包装了包括中国流行株在内的3种不同基因型的HCV包膜感染性假病毒颗粒并建立了基于假病毒颗粒的HCV体外中和抗体检测方法,为研究HCV感染早期特性及特异抗病毒药物的体外筛选提供了有效模型,并可用于HCV感染者体内及HCV基因工程疫苗免疫后中和抗体水平的分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮力	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	65	243	10.0	13.0
2	吴小兵	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	24	91	5.0	8.0
3	谭文杰	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	89	243	9.0	12.0
4	张柯	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	5	41	3.0	5.0
5	邓瑶	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	21	102	6.0	10.0
6	李津		1	21	1.0	1.0