原生动物单细胞PCR应用初探——以天蓝喇叭虫为例

• 作者: 余育和 刘志新
• 来源期刊: 湖泊科学
• 学科: 地球科学
• 关键词: 单细胞PCR 单细胞全基因组扩增 原生动物 天蓝喇叭虫
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 页码范围: 669-674
• 页数: 6页
• 分类号: P3
• 字数: 4845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.18307/2008.0517

摘要

以天蓝喇叭虫(Stentor coeruleus)为研究对象,探索了单细胞单基因PCR扩增及单细胞全基因组PCR扩增技术在原生动物中的应用.经过不断探索和优化条件后,试验取得了理想的结果.在40例单细胞单基因(SSU rDNA基因全序列)PCR的一次性扩增中,新鲜细胞和经过中性红染色的细胞都获得了100%的成功率,室温下酒精(95%)保存一周的细胞获得了82.5%的成功率.在单细胞全基因组PCR扩增中,采用高效高保真的phi29 DNA聚合酶结合随机引物(Random Primer)进行扩增,获得了丰富且质量较高的PCR产物.以全基因组扩增产物(稀释10倍)对四个常用的基因位点(TEF1、SSU rRNA、18S-ITS1-5.8S、a-tubulin)进行扩增,均成功获得相应的基因片断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余育和	中国科学院水生生物研究所	52	738	16.0	25.0
2	刘志新	中国科学院水生生物研究所	5	56	3.0	5.0