精原干细胞体内转染途径建立rsP3111转基因小鼠的可行性研究

• 作者: 史庭燕 周密 施惠娟 王健 袁瑶 贾晓峰
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 雄性生殖细胞载体法 特异性基因rsp3111 体外受精
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 138-143
• 页数: 6页
• 分类号: Q492
• 字数: 3475字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2008.03.002

摘要

目的 构建目的 基因rsp3111与荧光蛋白融合表达的质粒,并且实现目的 基因在体外受精胚胎及在体附睾成熟精子中表达.为进一步通过精原千细胞体内转染途径建立rsp3111转基因小鼠奠定基础.方法 将rsp311l基因以XholI和BamHI酶切后插入经同样酶切处理的真核细胞表达质粒pDsRed-Monomer-N1中,重组质粒为pDsRed-Monomer-N1-rsP3111.采用共培养和脂质体介导方法将ICR小鼠精子与pDsRed-Monomer-N1-rsP3111质粒共孵育,再与成熟的卵母细胞体外受精;或用脂质体介导睾丸直接注射法,将pDsRed-Monomer-N1-rSP3111导入小鼠睾丸中,通过PCR及荧光显微镜观察体外受精后的受精卵及体内睾丸转染rsp3111基因后附睾精子中是否有外源rsp3111基因的表达.结果 PCR结果表明,rsp3111基因成功地转入了附睾精子及受精卵中.荧光检测结果表明,目的 基因rsp3111在体外受精胚胎及睾丸的曲细精管中均有表达.结论 通过雄性生殖细胞载体法实现了大鼠配子特异性蛋白rsP3111在小鼠受精卵及睾丸、附睾精子中的表达;为进一步通过精原干细胞体内转染途径建立rsp3111转基因小鼠奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周密	复旦大学上海医学院	15	49	4.0	6.0
2	贾晓峰	国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海市计划生育科学研究所	3	5	2.0	2.0
3	史庭燕	国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海市计划生育科学研究所	1	2	1.0	1.0
4	王健	国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海市计划生育科学研究所	3	23	2.0	3.0
5	袁瑶	国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海市计划生育科学研究所	1	2	1.0	1.0