PRSV NIa-pro、NIa-vpg、NIb酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测

• 作者: 周鹏 沈文涛 王明钦
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: PRSV 酵母双杂交 诱饵载体 构建 检测
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 生物技术应用
• 页码范围: 369-373
• 页数: 5页
• 分类号: S432.4|Q78
• 字数: 2907字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2008.03.020

摘要

用PCR技术获得NIa-pro、NIa-vpg、NIb基因片段,将这些基因分别克隆到pBD-GAL4载体中,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD-GAL4-NIa-pro、pBD-GAL4-NIa-vpg和pBD-GAL4-NIb.测序正确后,将重组质粒导入YRG-2酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用.结果表明,获得了正确的NIa-pro、NIa-vpg、NIb基因片段,并成功克隆到pBD-GAL4诱饵载体中,且转化有诱饵载体的YRG-2在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,说明表达产物对酵母细胞无毒性,对报告基因也无自激活作用,为下一步利用酵母双杂交系统检测与NIa-pro、NIa-vpg、NIb蛋白相互作用的蛋白奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周鹏	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	129	1451	21.0	32.0
2	沈文涛	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	66	524	11.0	20.0
3	王明钦	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	4	16	2.0	4.0