D-siRNAs抑制A549细胞COX-2表达

• 作者: 罗红 胡冬煦 陈平
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 生物学
• 关键词: 环氧化酶2 A549细胞 D-SiRNAs RNA干扰
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 707-712
• 页数: 6页
• 分类号: Q256.2
• 字数: 3428字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2008.07.011

摘要

目的 长片段双链COX-2 RNA(dsRNAs)在体外经Dicer酶消化获得小RNA(D-siRNAs)抑制A549细胞COX-2的表达.方法 (1)IL-1β5 g/L干预A549细胞,Western blot法观察其COX-2蛋白表达的时间依赖性.(2)Trizol法抽提A549细胞总RNA,RT-PGR扩增COX-2基因.(3)设计两端带T7 promoter,SP6 promoter的COX-2 cDNA的PCR引物,通过PCR方法,获得两端带,T7及SP6 promoter的COX-2 DNA.(4)用RiboMAX Large Scale RNA Produc-tion Systems-SP6 and T7试剂盒体外将COX-2 DNA转录为RNA.(5)长片段COX-2 RNA经Dicer酶消化为小RNA(D-siRNAs).(6)用TransMessenger Transfection Reagent将D-siRNAs转染A549细胞.(7)COX-2 mRNA表达用RT-PCR检测,细胞培养上清液中PGE2含量用ELISA测定.结果 (1)IL-1β干预A549细胞9 haCOX-2表达到高峰.(2)在体外,长片段COX-2 dsRNAs经Dicer酶消化获得D-siRNAs.(3)D-siRNAs可有效抑制A549细胞COX-2的表达并降低PGE2的分泌.结论 长片段双链COX-2 RNA(dsRNAs)在体外经Dicer酶消化获得小RNA可有效抑制A549细胞COX-2的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈平	中南大学湘雅二医院呼吸科	259	2113	23.0	32.0
2	胡冬煦	中南大学湘雅二医院胸心外科	57	247	8.0	12.0
3	罗红	中南大学湘雅二医院呼吸科	50	410	12.0	18.0