Taqman探针实时定量PCR检测猪伪狂犬病毒

• 作者: 何孔旺 俞正玉 张雪寒 缪文凯 茅爱华
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪伪狂犬病毒 实时定量PCR Taqman探针 定量检测
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 440-443
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3053字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2008.04.012

摘要

选取猪伪狂犬病毒(PRV)基因组中gE基因,设计特异性引物和Taqman探针,利用实时定量PCR来定量检测PRV.利用PCR技术扩增猪伪狂犬病毒gE基因80 bp片段,并克隆到pMD18-T载体上,阳性重组质粒命名为pgE80.pgE80质粒进行10倍系列稀释,作为荧光PCR检测的标准模板,定量拷贝数,并绘制标准曲线.以提取的PRV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(PRRSV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)的DNA作为模板,进行特异性检测.该实时定量PCR方法,标准曲线斜率为-0.37,R2=0.992,可以检测到20个拷贝数.PRV能被扩增出S型荧光曲线,而其它病毒均未能扩出.用PRV强毒肌肉注射仔猪,定量PCR比普通PCR更能灵敏而特异地检出呼吸道排毒和血液带毒.建立的实时定量PCR方法可用于临床样品快捷、准确、方便地检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何孔旺	江苏省农业科学院兽医研究所	101	1368	22.0	33.0
2	俞正玉	江苏省农业科学院兽医研究所	16	93	6.0	8.0
3	张雪寒	江苏省农业科学院兽医研究所	21	120	7.0	10.0
4	茅爱华	江苏省农业科学院兽医研究所	13	43	4.0	6.0
5	缪文凯	江苏省农业科学院兽医研究所	1	14	1.0	1.0