反转录PCR技术检测贝类中诺瓦克样病毒的研究

• 作者: 张伟 张颖 李英军 桑亚新 袁耀武 马晓燕
• 来源期刊: 中国食品学报
• 学科: 工学
• 关键词: 诺瓦克样病毒 反转录PCR 贝类 检测
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 分析与检测
• 页码范围: 130-138
• 页数: 9页
• 分类号: TS2
• 字数: 5598字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7848.2008.04.022

摘要

目的:从病毒富集和核酸提取两方面进行探索,旨在建立一个反转录(RT)PCR技术检测贝类中诺瓦克样病毒(NLVs)的方法.方法:利用脊髓灰质炎病毒作为参照毒株,优化甘氨酸缓冲液一聚乙二醇(PEG)病毒浓缩方法;同时比较异硫氰酸胍法、SDS一蛋白酶K法、Trizol-异丙醇法、试剂盒法4种RNA提取方法:对市售贝类样品进行了检测,并利用基因测序对阳性样品进行验证.结果:采用pH 9.5甘氨酸缓冲液-16%聚乙二醇病毒浓缩法,病毒的回收率为16.8%;利用Trizol-异丙醇法提取RNA,检出限为8.1×102 RT-PCR50/5gg贝肉;实际检测贝类样品25件,其中3件样品为阳性,基因测序结果亦证实为阳性.结论:建立了一个灵敏度较高的RT-PCR检测贝类中诺瓦克样病毒的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	桑亚新	河北农业大学食品科技学院有害微生物检测与控制研究室	74	588	15.0	21.0
2	袁耀武	河北农业大学食品科技学院有害微生物检测与控制研究室	52	485	11.0	21.0
3	张伟	河北农业大学食品科技学院有害微生物检测与控制研究室	241	2103	25.0	35.0
4	李英军	河北农业大学食品科技学院有害微生物检测与控制研究室	55	591	15.0	22.0
5	张颖	中国环境管理干部学院生态学系	44	405	12.0	18.0
6	马晓燕	河北农业大学食品科技学院有害微生物检测与控制研究室	63	566	12.0	20.0