脑特异性分子标志物vsnl1基因的克隆及原核表达

• 作者: 薛利军 褚澄 赵忠新
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 脑 分子标志物 vsnl1基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 页码范围: 11-15
• 页数: 5页
• 分类号: R651.1|Q786
• 字数: 3167字
• 语种: 中文

摘要

从健康BALB/c小鼠脑组织提取总RNA,逆转录获得cDNA.根据GenBank公布的视锥蛋白样基因1(vsnl1)基因序列设计引物,以鼠脑cDNA为PCR模板扩增vsnl1.将目的片段克隆至pMD18-T载体,经酶切和测序鉴定重组质粒pMDT-v.将vsnl1基因亚克隆至6×His原核表达载体pROEX-HTb,转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达和Ni-NTA柱纯化,并采样进行SDS-PAGE分析.结果表明:RT-PCR扩增产生了与vsnl1大小吻合的目的片段,测序及BLAST比对提示与已公布序列的同源性为99%,将序列提交GenBank.SDS-PAGE显示,经IPTG诱导,重组质粒pROEX-v转化菌表达了约22ku的蛋白,与预期分子量大小一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	褚澄		1	2	1.0	1.0
5	赵忠新		1	2	1.0	1.0