凋亡蛋白质的原核表达与纯化

• 作者: 傅文彬 宋聿文 李素霞 王富军 石璇 范立强 袁勤生 赵健
• 来源期刊: 食品与药品
• 学科: 生物学
• 关键词: 凋亡蛋白质 原核表达 可溶性 纯化 稳定性
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3159字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-979X.2008.02.002

摘要

目的 构建来自鸡贫血病毒(CAV,chicken anaemia virus) VP3基因编码的凋亡蛋白质表达载体,在大肠杆菌中进行表达,并研究凋亡蛋白质的纯化和稳定性.方法 PCR(polymerase chain reaction)获得正确编码VP3基因片断,构建表达质粒pET-28a-VP3在E.coli BL21(DE3)中表达.用Ni-NTA柱纯化可溶性目标蛋白质,并研究不同条件下凋亡蛋白质的稳定性.结果 目标蛋白质在大肠杆菌中获得表达,纯化后蛋白质纯度高于90%,卡拉胶可明显提高重组蛋白质可溶状态下的稳定性.结论 成功获得高纯度VP3可溶性蛋白质,增加了目标产物的稳定性,为进一步研究该蛋白质的临床应用奠定基础.