毕赤酵母表达重组hPK-5蛋白不均一性的鉴定

• 作者: 史新昌 李永红 王军志 袁力勇 陶磊 饶春明
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: hPK-5 毕赤酵母 重组蛋白 不均一性
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 180-184
• 页数: 5页
• 分类号: R917
• 字数: 3431字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2008.03.006

摘要

对毕赤酵母表达重组人纤溶酶原Kringle 5(hPK-5)蛋白的不均一性进行了鉴定.应用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法及分子排阻高效液相色谱(SEC-HPLC)和反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行纯度分析.采用糖蛋白染色法鉴定是否为糖蛋白.以Edman降解法测定N端氰基酸,采用高效液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间质谱(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)联用技术测定蛋白质精确分子质量.结果表明:SDS-PAGE测定为单一条带,纯度大于95%,SEC-HPLC测定为单一色谱峰,纯度大于95%,RP-HPLC测定为几个紧密相连的峰.糖蛋白染色为阴性.N端氨基酸测定结果表明含多个N端氨基酸.液质联用测定精确分子质量的结果表明hPK-5蛋白是相对分子质量分别为10 744.88,10 646.00,10 533.00和10 419.63的混合物.以上结果准确鉴定出毕赤酵母表达的该重组hPK-5蛋白是C端完整而N端依次缺失0～3个氨基酸的不均一蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁力勇		22	83	6.0	8.0
2	饶春明		85	287	9.0	12.0
3	王军志		95	504	11.0	16.0
4	史新昌		16	32	3.0	5.0
5	李永红		17	36	3.0	5.0
6	陶磊		6	2	1.0	1.0