梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较

• 作者: 严杰 孙爱华 彭敏峰 毛亚飞 范兴丽 范春红
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 酶联免疫吸附测定/方法 梅毒 密螺旋体,苍白/免疫学 敏感性与特异性 基因表达 抗原,细菌/血液 梅毒血清诊断/方法 免疫显性表位/生物合成 免疫显性表位/遗传学 重组,遗传
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 67-72
• 页数: 6页
• 分类号: R377
• 字数: 3455字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2008.01.012

摘要

目的:克隆并构建梅毒螺旋体tpn17、tpn47基因原核表达系统,建立基于rTpN17、rTpN47的ELISAs,并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价.方法:采用PCR扩增tpn17和tpn47基因并构建tpn17和tpn47基因原核表达系统.采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rTpN17和rTpN47 表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rTpN17和rTpN47,Western blot检测rTpN17和rTpN47免疫反应性.分别以rTpN17和rTpN47为包被抗原,建立检测血清标本中梅毒抗体的ELISAs(rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA),检测200例健康人、25例类风湿关节炎(RA)和17例系统性红斑狼疮(SLE)患者血清样本,并与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体间接血凝试验(TPHA)检测效果进行比较.结果:克隆的tpn17和tpn47基因与GenBank中相关序列相似性为100%.rTpN17和rTpN47表达量分别为细菌总蛋白的37.2%和26.8%.提纯后的rTpN17和rTpN47能与梅毒抗体阳性血清发生明显的结合反应.TPHA检测阳性率最高(99.1%,P<0.001),rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA检测阳性率相近(85.3%和84.3%,P=0.427),TRUST检测阳性率低于rTpN17-ELISA(P=0.001),但与rTpN47-ELISA相近(P=0.014).所有健康人血清、RA和SLE患者血清标本的rTpN17-ELISA、rTpN47-ELISA和TPHA检测结果均为阴性,但有7.1%(3/42)RA和SLE患者血清标本TRUST检测结果阳性.结论:以rTpN17和rTpN47为抗原的ELISAs可作为快速、简便、敏感性和特异性较高的梅毒血清学筛查方法,而且rTpN17和rTpN47仍保持原有免疫反应特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙爱华		112	523	11.0	15.0
3	范兴丽		22	103	6.0	9.0
4	严杰	浙江大学医学院病原生物学系	265	1149	14.0	20.0
5	毛亚飞	浙江大学医学院病原生物学系	41	232	9.0	12.0
6	范春红		21	166	8.0	12.0
7	彭敏峰	杭州市中医院检验科	14	39	3.0	6.0