农杆菌介导大豆子叶节遗传转化体系的优化研究

• 作者: 姬月梅 宋晓华 常汝镇 张丽娟 李英慧 邱丽娟 陈受宜
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 遗传转化 子叶节 Na+/H+逆向转运蛋白 再生
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 26-32
• 页数: 7页
• 分类号: S5
• 字数: 6691字
• 语种: 中文

摘要

以大豆品种"中豆32、Peking、早熟18、绥农14"子叶节为受体材料,用农杆菌介导法转入与抗逆相关的小麦Na+/H+逆向转运蛋白基因(TaNHX2),探索外植体大小、培养基主要成分、培养时间等因素对外植体分化的影响,旨在优化遗传转化条件,提高大豆转基因的遗传转化效率.研究结果表明,以健康外植体获得率、抗性丛生芽获得率和抗性芽伸长比率为指标,筛选并建立的优化转化系统为:大豆萌发和不定芽诱导时分别加入0.5 mg L-16-BA和1.0 mg L-16-BA,浸染时间为30 min、共培养时间为3 d;外植体大小为2/3子叶,kan抗性筛选浓度第一阶段和第二阶段分别是60和50 mg L-1;利用上述方法,已获得中豆32转基因再生植株,经PCR分子检测,证明目的基因TaNHX2已导人并整合到大豆基因组中,转化率为3.78%.