兔抗麻雀IgY酶标抗体的制备

• 作者: 刘先菊 张连峰 杨帆 林树柱 秦川
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 麻雀 抗IgY HRP
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 41-44
• 页数: 4页
• 分类号: Q813
• 字数: 3176字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2008.05.011

摘要

目的 制备辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗麻雀IgY抗体,为禽类血清学检测体系的建立提供技术储备.方法 硫酸铵盐析法粗提麻雀血清IgY,进一步在SDS-PAGE上分离后,切下带有目的 条带的凝胶作为免疫原,免疫实验兔制备抗血清,Protein-A柱亲和纯化兔抗IgY血清IgG,,使用改良过碘酸钠法制备酶结合物.ELISA检测酶标抗体的工作浓度,western blotting检测酶标抗体的特异性.结果 ·硫酸铵盐析法粗提IgY,可去除部分杂蛋白,SDS-PAGE上分离后切下带有目的 条带的凝胶,可以得到足够纯度的抗原,将带有IgY的凝胶作为抗原免疫后获得的抗血清经Protein-A纯化后,二抗在SDS-PAGE上鉴定,纯度达到99%以上.改良的过碘酸钠法标记获得的抗体浓度为1.008 mg/mL, ELISA检测酶标抗体效价为1:1000.Western blotting鉴定抗体具有特异性.结论 获得了优质可靠的兔抗麻雀IgY酶标抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林树柱	中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室	12	62	5.0	7.0
2	张连峰		67	463	12.0	18.0
3	杨帆	中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室	26	142	7.0	10.0
4	刘先菊	中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室	17	55	5.0	6.0
5	秦川	中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室	84	504	11.0	19.0