抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及ciELISA试剂盒的研制

• 作者: 崔艳红 张改平 张海棠 朱超 王自良 王艳荣 邓瑞广
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 氯霉素 人工免疫原 单克隆抗体 ciELISA试剂盒
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医学
• 页码范围: 65-70
• 页数: 6页
• 分类号: S859.84
• 字数: 4505字
• 语种: 中文

摘要

将氯霉素(CAP)化学修饰引入羧基活性基团,形成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS),用混合酸酐法制备免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用UV,SDS-PAGE进行鉴定;BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CAPmAb,并鉴定其免疫学特性;应用CAP mAb研制CAP残留快速检测ciELISA试剂盒(CAP-Kit),并测定其性能.结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,分子结合比为1:15.6;筛选出3株杂交瘤,其中最好的4F9株间接ELISA效价细胞上清为1:1.28×103,腹水为1:6.4×105,亲和常数(Ka)为1.84×1010L·mol-1,半教抑制浓度(IC50)为2.4 μg·L-1,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR)为150%,与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应;CAP-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为0.1～128 μg·L-1,灵敏度为0.053 μg·L-1,检测限为0.1 μg·L-1,奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%,82.7%,平均批内和批间变异系数<15%.CAP-Kit在4 ℃可保存180 d.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王艳荣	河南科技学院动物科学学院	60	466	14.0	19.0
2	张海棠	河南科技学院动物科学学院	114	750	15.0	21.0
3	王自良	河南科技学院动物科学学院	141	803	15.0	20.0
4	崔艳红	河南科技学院动物科学学院	88	743	16.0	23.0
5	张改平		31	275	10.0	15.0
6	邓瑞广		17	163	8.0	12.0
7	朱超	河南科技学院动物科学学院	1	1	1.0	1.0