脐血CD133+细胞体外扩增巨核系祖细胞的研究

• 作者: 万卫红 刘祖林 刘金伟 方宁 王丽 祁莹 章涛 陈代雄
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD133+细胞 造血干/祖细胞 巨核系祖细胞 体外扩增 脐血
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 造血干细胞移植与相关基础
• 页码范围: 645-649
• 页数: 5页
• 分类号: R329.28
• 字数: 3701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2008.03.039

摘要

本研究探讨脐血CD133+(UCB-CD133+)细胞体外扩增巨核系祖细胞的能力和最佳收获时间.采用免疫磁珠激活细胞分选系统(MACS)分选UCB-CD133+细胞,将纯化的UCB-CD133+细胞接种于含TPO、IL-3和SCF的无血清液体培养体系中体外扩增巨核系祖细胞,在培养第7、10和14天进行细胞计数,流式细胞仪检测扩增过程中CD133、CD34、CD41抗原表达的动态变化,并采用半固体法对不同扩增阶段的细胞进行巨核祖细胞集落形成单位(CFU-MK)培养.结果表明:培养至第7天时,UCB-CD133+细胞扩增效果最佳,扩增了8.2±2.2倍;培养至第14天,细胞总数扩增了116倍;培养至10天时,平均1个CD133+细胞所产生的CD133+ CD41+和CD34+CD41+细胞数最多,分别为2.5±0.9和2.6±0.5个,所产生的CD41+ 细胞为20.3±5.9个;扩增前后的UCB-CD133+ 细胞均能形成CFU-MK,扩增第10天的UCB-CD133+细胞所形成的CFU-MK总数最多,CFU-MK扩增倍数为59.5±11.8倍.巨核细胞免疫组织化学染色显示,扩增后的巨核系细胞多呈幼稚状态,未见血小板形成.结论:UCB-CD133+ 细胞具有较强的体外扩增巨核系祖细胞的能力,培养第10天扩增效能最佳.